常用的伊紅美藍乳糖培養基，可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌，因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸，菌體帶H+，故菌落被染成深紫色，從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。

伊紅為酸性染料，美藍為堿性染料。 當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍結合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。在堿性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色，伊紅和美藍不能結合，故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。

伊紅美藍培養基配置方法如下：

1、材料：蛋白胨 10g ；* 2g ；瓊脂 20~30g ；蒸餾水 1000ml ；2%伊紅水溶液 20ml ；0.5 %美藍水溶液 13ml 。

2、儲備培養基的制備：先將瓊脂加至900ml蒸餾水，加熱溶解，然后加入*及蛋白胨，混勻使之溶解，再以蒸餾水補足至1000ml，調整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾，再加入乳糖，混勻后定量分裝于燒瓶內，置高壓蒸汽滅菌器內以115℃滅菌20min，貯存于冷暗處備用。

3、制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正PH，分裝于燒瓶內，121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至50～55℃，加入伊紅和美藍溶液，搖勻，傾注平板。