簡介： 
克倫特羅（Clenbuterol）屬于beta興奮劑，是一種高選擇性的興奮劑和激素，具有水解脂肪、合成代謝和對非條紋肌肉組織的松弛作用。進(jìn)年來被一些人非法添加到飼料中以提高脂肪型動物的瘦肉率和加速動物的生長。當(dāng)用作生長調(diào)節(jié)劑時，其添加量是治療量的5—10倍，常在動物體內(nèi)殘留而給消費(fèi)者帶來危害。 
通常，HPLC或gc-ms是克倫特羅殘留檢測的確證方法，但是其前處理步驟費(fèi)用昂貴，而ELISA快速檢測試劑盒因成本低、操作簡便、速度快、一次檢測樣本量大、儀器化低，現(xiàn)已成為常規(guī)的篩選方法。 
1.檢測原理： 
測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。微孔板上包被有針對兔IgG（Clenbuterol抗體）的羊抗體，含有克倫特羅抗原的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品與酶標(biāo)記物被加入到小孔中，經(jīng)過孵育及洗滌步驟后，游離的抗原與抗原酶標(biāo)記物競爭抗體結(jié)合位點(diǎn)，沒有結(jié)合的抗原酶標(biāo)記物在清洗步驟中被除去，將顯色液加入到孔中并且孵育，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。在450nm處測量，吸光強(qiáng)度與樣品的克倫特羅濃度成反比。 
2.操作時間：1小時(30分鐘孵育+30分鐘顯色) 
3.檢測下限：0.1ppb 
4.回收率： 
尿樣和血清： 97-110% 
飼料： 95- 
肝臟/組織： 90-97% 
牛奶及奶粉  
5.交叉反應(yīng)率： 
Clenbuterol (克倫特羅)  
Mabuterol（馬普特羅）  
Mapenterol（馬噴特羅）  
Salbutamal () 8-9% 
Terbutalin (特普他林) 7-8% 
Simarterol(塞曼特羅) <0.1% 
Isoproterenol（異丙腎上腺素） <0.1% 
Fenoterol（非諾特羅） <0.1% 
6.試劑盒的組成： 
1) 96孔酶標(biāo)板：12條╳8孔（包被有抗兔IgG）. 
2) 克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液6瓶：1ml /瓶，為Clenbuterol水溶液:0.1ng/ml，0.3 ng/ml，0.6 ng/ml，1.25 ng/ml，2.5 ng/ml，5 ng/ml. 
3)酶聯(lián)結(jié)合物Conjugate peroxidase： 6ml 黃蓋 
4) 抗Clenbuterol抗體溶液：Anti-clenbuterol antibody 11ml 紅蓋 
5) 沖洗液（需10倍稀釋）Wash buffer： 50ml 塑料瓶 
6) 檸檬酸鹽緩沖液Citrate buffer： 25ml 藍(lán)蓋 
7)底物溶液Chromogen： 3 ml 黑蓋 
8)樣品稀釋液（需20倍稀釋）Diluent solution: 10ml 綠蓋 
9)反應(yīng)終止液Stop solution： 6ml 白蓋