羊源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒說明書

1、試劑盒簡介貨為了適應(yīng)羊源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要，本公司參照 OIE 國際標準中規(guī)定的引物序列，經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化，開發(fā)生產(chǎn)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。2、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑，具體組成參見表 1：s
表 1：試劑盒組成（50test/盒）

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
 
標記物：血清 血漿 組織勻漿等
 
應(yīng)用：僅用科研實驗檢測定量，定性檢
 
檢測方法：夾心法
 
技術(shù)要求：全程按說明書步驟檢測，操作規(guī)范，專業(yè)，儀器設(shè)備齊全。

規(guī)格：48t/96t 

性狀：液體 

運輸方式：快遞發(fā)貨 

有效期：6個月品

特點：靈敏性高，---性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高，是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。

使用范圍：此產(chǎn)品供科研實驗使用，不得用于---。

用途：用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
注意事項:
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。 
每個樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2。
表 2 每個樣品測試反應(yīng)體系配制表

試劑盒組成及試劑配制：
1.  酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。