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從標本收集、保存、預試驗、實驗、數據分析等全實驗過程提供完整的技術指導。

產品屬性：

產品名稱：DEFA3中性粒細胞防御素3酶聯免疫試劑盒

英文名稱：DEFA3 ELISA Kit

規格：48T/96

貨號：CS-1991E

主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準備：

1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

注意事項：

1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完，請廢棄。

2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正?，F象，微加熱至40℃使結晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應為室溫。

4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應終止液除外）。

5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。

7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗結果。

8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時，請按國家生物試驗室安全防護條列執行。

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3-溴-4-三氟 97% GHRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit  人促生長激素釋放激素兔間隙連接蛋白(Cx)聯免疫吸附測定試劑盒

3-溴-4-三氟 97%PROG(Human Progesterone) ELISA kit  人孕激素/孕酮兔非受體酪氨激2(TNK2)聯免疫吸附測定試劑盒

3-溴-2-氟三氟 98%uE3(Human ultra Estriol) ELISA KIT  人超敏游離雌三兔蛋白3抗體(PR3Ab)聯免疫吸附測定試劑盒

3-溴-4-氟三氟 97%NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit  人去素兔白介素11(IL-11)聯免疫吸附測定試劑盒

4-溴-2-氟三氟 98%PGF(Human Prostaglandin F) ELISA Kit  人前列腺素F兔胃蛋白原A(PGA)聯免疫吸附測定試劑盒

4-溴-3-氟三氟 98%PGE1(Human Prostaglandin E1) ELISA Kit  人前列腺素E兔鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)聯免疫吸附測定試劑盒

4-溴-3-硝三氟 98%ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit  人內皮素1兔封閉蛋白9(CLDN9)聯免疫吸附測定試劑盒

5-溴-2-三氟 98%FSH(Human follicle-stimulating hormone) ELISA Kit  人促卵泡素兔γ谷氨酰轉移1(γGT1)聯免疫吸附測定試劑盒

5-溴-2-硝三氟 98%f- BetahCG(Human free chorionic gonadotropin) ELISA KIT  人游離β絨毛膜促性兔血管緊張素II受體2抗體(ANGⅡR2-Ab)聯免疫吸附測定試劑盒  

5-溴-2-三氟 97%Big ET(Human Big Endothelin) ELISA Kit  人大內皮素兔核因子κB抑制蛋白α(IκBα)聯免疫吸附測定試劑盒

5-溴-2-氟 97%i-PTH(Human intact Parathormone) ELISA Kit  人全段狀旁腺素兔纖溶-抗纖溶復合物(PAP)聯免疫吸附測定試劑盒

4-溴-2-氟芐溴 98%CT(Human Calcitonin) ELISA Kit  人降鈣素兔高分子量角蛋白(CK-HMW)聯免疫吸附測定試劑盒

5-溴-2-氟 98%TSH(Human Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit  人促狀腺素兔3-羥-3-戊二酰輔A合1(HMGCS1)聯免疫吸附測定試劑盒

操作步驟：

1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。