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*G(IgG)elisa試劑盒使用方法

2015年01月07日 08:10:02人氣:131來源:上??婆d商貿有限公司

資料類型doc文件資料大小105472
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關 鍵 詞elisa試劑盒
【資料簡介】

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

80μg/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

40μg/ml

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

20μg/ml

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

10μg/ml

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

5μg/ml

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液



  1. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  2. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  
  3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
  4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  6. 溫育:操作同3
  7. 洗滌:操作同5。
  8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
  9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
  10. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

上海科興商貿有限公司作者

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