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熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG,Anti-TSLC1/FITC
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關(guān) 鍵 詞 | 熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG,Anti-TSLC1/FITC,熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1 |
- 【資料簡介】
熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG,Anti-TSLC1/FITC
1)免疫脾細胞的制備 制備單克隆抗體的動物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備,也可采用脾內(nèi)直接免疫法。
2)骨髓瘤細胞的培養(yǎng)與篩選在融合前,骨髓瘤細胞應(yīng)經(jīng)過含8-AG的培養(yǎng)基篩選,防止細胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性(恢復(fù)HGPRT的活性的細胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活)。骨髓瘤細胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),融合前24h換液一次,使骨髓瘤細胞處于對數(shù)生長期。
3)細胞融合的關(guān)鍵:
1技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如,供者淋巴細胞沒有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。
2融合試驗zui大的失敗原因是污染,融合成功的關(guān)鍵是提供一個干凈的環(huán)境,以及適宜的無菌操作技術(shù)。
4)陽性克隆的篩選應(yīng)盡早進行。通常在融合后10天作*次檢測,過早容易出現(xiàn)假陽性。檢測方法應(yīng)靈敏、準確、而且簡便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì),以及所需單克隆抗體的功能進行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法zui簡便,RIA法zui準確。陽性克隆的篩選應(yīng)進行多次,均陽性時才確定為陽性克隆進行擴增。
5)克隆化克隆化的目的是為了獲得單一細胞系的群體。克隆化應(yīng)盡早進行并反復(fù)篩選。這是因為初期的雜交瘤細胞是不穩(wěn)定的,有丟失染色體的傾向。反復(fù)克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細胞株。克隆化的方法很多,而zui常用的是有限稀釋法。Anti-TSLC1/FITC 熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG Anti-TSLP/FITC 熒光素標記淋巴細胞生成素-1抗體IgG Anti-TTF-1/FITC 熒光素標記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強子結(jié)合蛋白抗體IgG Anti-TTF-2/FITC 熒光素標記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG Anti-Tubb3/FITC 熒光素標記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG Anti-Tubulin-α/FITC 熒光素標記微管蛋白α抗體IgG Anti-Tubulin-β/FITC 熒光素標記微管蛋白抗體IgG Anti-Tubulin-β/FITC 熒光素標記微管蛋白抗體IgG Anti-β-Actin/HRP 辣根過氧化物酶標記β-肌動蛋白(抗體) Anti-Tubulin-γ/FITC 熒光素標記微管蛋白-γ抗體IgG Anti-VTG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體IgG Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記腫瘤抑素抗體IgG Anti-TWIST protein/FITC 熒光素標記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白抗體IgG Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗人可溶性纖維蛋白原抗體IgG Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標記*羥化酶抗體IgG Anti-Tyrosinase/FITC 熒光素標記*酶抗體IgG
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