精品视频在线观看一区二区三区_v片免费看_欧美国产精品久久_国产真实乱免费高清视频_欧美精欧美乱码一二三四区_狠狠色婷婷j丁香综合社区

技術中心

豬圓環病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

2020年11月27日 15:16:02人氣:135來源:上海西格生物科技有限公司

資料類型doc文件資料大小44032
下載次數15資料圖片 【點擊查看】
上 傳 人上海西格生物科技有限公司 需要積分0
關 鍵 詞豬圓環病毒1型,探針法,熒光定量PCR試劑盒
【資料簡介】

豬圓環病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

1、 試劑盒簡介貨為了適應展開豬圓環病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 標準中規定的引物序列,經多次實驗及系統優化,開發生產了本試劑盒。應用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應用廣泛和高通量檢測等特點及優點。2、試劑盒組成:

試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表 1:

表 1:試劑盒組成(50test/盒)

        
*保存條件:樣品 DNA 提取液 1、2 和試劑盒須在-20℃保存。

 2、樣本采集,存放及運輸

 2.1 樣本采集

所用取樣器材必須經過高壓滅菌并烘干。取對蝦的腮絲、肝胰腺、腹肢等組織各30mg標記后置于離心管中,按照試劑盒配套的DNA抽提試劑盒操作說明提取DNA模板。

 2.2 存放

研磨后的樣本應盡快提取 DNA;待測樣本應避免凍融。

 2.3 運輸

 采用或泡沫箱加冰密封進行運輸。

 3.1 PCR 檢測

 3.1.1 擴增試劑準備(在反應混合物配制區進行):

從試劑盒中取出相應的 PCR 反應液、Taq 酶,2000×g 離心 5 秒鐘。每個樣品測試反應體系配制見下表 2。

表 2 每個樣品測試反應體系配制表

                                                                                 

3.1.2 加樣(樣本處理區進行):

向每個 PCR 管孔中各分裝 15μL 的混合液,再分別加入樣本 DNA 模板 10μL,蓋緊管蓋,500

r/min 離心 30 s。

3.1.3 PCR 檢測(在檢測區進行): 階段,95 ℃/3 min;

第二階段,94 ℃/30 sec,60 ℃/30sec;72℃/1 min;35個循環;

第三階段,72 ℃/7 min; 第四階段,4 ℃ 保存

 3.1.4 瓊脂糖電泳

用電泳緩沖液制備 1.5%的瓊脂糖凝膠平板。將平板放入水平電泳槽,使電泳緩沖液剛好沒過膠面,向 PCR 擴增產物中加入 1/6 體積的電泳上樣緩沖液(6X 上樣緩沖液),按比例混勻后加入樣品孔。在電泳時設立 DNA DL2000 Marker 做對照。5 V/cm 電泳約 0.5h,當溴酚藍到達一定位置時停止。在紫外燈下或凝膠成像儀的紫外透射光下觀察是否擴增出預期的特異性 DNA 電泳帶,拍攝并記錄。

4、檢測步驟

4.1.1 DNA 核酸提取操作方法(在樣本處理區進行):

取 n 個 1.5ml 滅菌 Eppendorf 管,其中 n 為待檢樣品數和一管陰性對照之和,對每個管進行編號標記。(注:試劑盒中的陽性對照直接作為 PCR 檢測的模板,無需提取核酸)

4.1.2 每管加入 100 μl DNA 提取液 1,然后分別加入待測樣本和陰性對照各 100μl,一份樣本換用一個吸頭;混勻器上震蕩混勻 5 s,于 4℃~25℃條件下,12 000 r/min 離心 10 min。

4.1.3 盡可能吸棄上清且不碰沉淀,再加入 10μl DNA 提取液 2,混勻器上震蕩混勻 5s,于 4℃~25℃ 條件下,2 000 r/min 離心 10 s。

4.1.4 100℃ 干浴或沸水浴 10 min;加入 90μl DEPC 水,12 000 r/min 離心 10 min,吸取上清, 即為提取的 DNA,冰上保存待用(提取的 DNA 需在 2 h 內進行 PCR 擴增或放置于-70℃冰箱內保存)。

5、結果判定

5.1 PCR 后,陽性對照會出現一條 196bp 的 DN段。陰性對照和空白對照沒有該核酸帶。

5.2 待測樣品 PCR 擴增后能在相應 196 bp DNA 位置上有帶,可判為 BP 核酸陽性。

 6、相關技術信息

F: 5’-GAT-CTG-CAA-GAG-GAC-AAA-CC-3’

R: 5’-TAC-CCT-GCA-TTC-CTT-GTC-GC-3’ 

上海西格生物科技有限公司作者

上一篇:FY型高溫液下泵zui高使用溫度400℃

下一篇:恒溫恒濕試驗箱保養措施分享


我要投稿
  • 投稿請發送郵件至:(郵件標題請備注“投稿”)hbzhan@vip.qq.com
  • 聯系電話0571-87759680
環保行業“互聯網+”服務平臺
環保在線APP

功能豐富 實時交流

環保在線小程序

訂閱獲取更多服務

微信公眾號

關注我們

抖音

環保在線網

抖音號:hbzhan

打開抖音 搜索頁掃一掃

視頻號

環保在線

公眾號:環保在線

打開微信掃碼關注視頻號

快手

環保在線

快手ID:2537047074

打開快手 掃一掃關注
意見反饋
主站蜘蛛池模板: 激情二区 | 97国产| 操女生免费视频 | 久久丁香综合 | 综合欧美亚洲日本少妇 | 最新中文字幕在线视频 | 成人美女免费网站视频 | 国产午夜伦理 | 久久aⅴ人妻少妇嫩草影院 脱了我奶罩亲我奶头好舒服 | 久久综合精品国产丝袜长腿 | 欧美激情极品久久久久久 | 亚洲免费一二三区 | 国产精成A品人V在线播放 | 国产精品88久久久久久妇女 | 7194中文乱码一二三四芒果 | 国产丨综合丨精品入口 | 91在线免费公开视频 | voyeur精品偷窥 | 国产日韩精品视频一区 | 九色在线播放 | 国产三级精品三级男人的天堂 | 免费观看全黄做爰的视在线观看 | 欧美成人免费在线 | 亚洲精品第一区二区三区 | 精品欧美一区二区在线观看欧美熟 | 自拍偷自拍亚洲精品情侣 | 国产精品亚洲一区二区三区正片 | 亚洲AV久久久久久久无码 | 国产学生系列一区二区三区 | 国产乱人伦偷精品视频免 | 国产精品一级二级在线观看 | 欧美日韩一卡2卡三卡4卡乱码欧美孕交 | 亚洲人成网77777色在线播放 | 人妻系列无码中文字幕专区 | 国产做受网站 | 被两个黑人玩得站不起来了 | 麻豆网站在线免费观看 | 在线观看成人免费视频 | 亚洲AV无码午夜国产精品色软件 | 日日日日日日日 | 国产成人亚洲综合a∨婷婷图片 |