培養基生產和使用常見問題

【資料簡介】

1.低血清培養基能用肉眼判斷其pH值嗎？
答：低血清培養基中酚紅的含量與普通培養基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值，建議使用pH計進行測定。
2.*溶液和*的配制方法是什么？
答：以0.2mol/L的 L-*配制為例：稱取L-*2.92g，加注射用水100ml，充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應在4℃下避光保存，2周內使用。以7.5% NaHCO3的配制為例：稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。
3.什么培養基中可以省去加酚紅？
答：酚紅在培養基中用作pH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響，可以通過純化技術去除，但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡，影響細胞生長，當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分，很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。
4.放置在冰箱中的培養基顏色會發生變化，為什么？
答：培養基保存于4℃冰箱中，培養基內CO2 會逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性。而培養基中酸堿指示劑（通常為phenol red）的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養基偏堿后再用于細胞培養將造成細胞生長停滯或死亡。培養基偏堿時，可以通入無菌過濾的CO2，以調整pH值。