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大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA檢測試劑盒組成配制說明
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關 鍵 詞 | 試劑盒,標準品,酶,檢測 |
- 【資料簡介】
大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA檢測試劑盒組成配制
1. 酶聯板:一塊(96孔)
標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為10,000 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋10,000 pg/ml,5,000 pg/ml,2,500 pg/ml,1,250 pg/ml,625 pg/ml,312.5 pg/ml,156 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制5,000 pg/ml標準品:取0.5ml 10,000 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
2. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
3. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
4. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
5. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100ul),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
6. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
7. 底物溶液:1×10ml/瓶。
8. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
9. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA檢測試劑盒注意事項
1. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2. 一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
4. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。
5. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
6. 底物請避光保存。
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