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技術(shù)中心

人羧肽酶B(CPB)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

2017年08月15日 11:15:14人氣:150來(lái)源:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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關(guān) 鍵 詞人羧肽酶B,CPB,ELISA試劑盒
【資料簡(jiǎn)介】

人羧肽酶B(CPB)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū):
英文名稱(chēng):Human CPB ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類(lèi)型:夾心法
檢測(cè)范圍:
zui低檢測(cè)限:
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

產(chǎn)品介紹
一、服務(wù)

      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

      如果您在使用ELISA試劑盒產(chǎn)品時(shí)有任何的疑問(wèn),或者對(duì)我們有任何意見(jiàn)建議,您都可以通過(guò)來(lái)電或咨詢(xún),我們的銷(xiāo)售/技術(shù)工程師7×24h為您服務(wù)。

二、ELISA檢測(cè)概述

      ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

      實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶(hù)提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。

三、技術(shù)流程

雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)    間接法(檢測(cè)未知抗體)
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、人羧肽酶B(CPB)ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。    1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
四、客戶(hù)須知

1、液體類(lèi)標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等);

2、樣本保存:請(qǐng)盡早檢測(cè),2-8℃保存一天;需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,置-20℃或-70℃保存;

3、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求。

五、報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)

1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線;

2、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟;

3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑耗材,實(shí)驗(yàn)方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說(shuō)明);

4、人羧肽酶B(CPB)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段,我公司客服人員會(huì)及時(shí)向您匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。

上海莼試生物技術(shù)有限公司作者

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