DNA切除修復蛋白1抗體相關信息

方法
1．Bio-Rad微型凝膠電泳模具的安裝
帶上手套將凝膠電泳系統的前后玻璃板，梳子用去污劑洗滌，zui后再用去離子水沖洗干凈，除去黏附在玻璃板上凝固的膠和其他污垢。晾干玻璃板或用電吹風吹干。將玻璃板的橡膠墊條用吸水紙吸干，然后按Bio-Rad Mini-Protean電泳系統的使用說明書安裝好玻璃板，固定于制膠板上。

2．SDS-PAGE凝膠的配制
① 根據實驗檢測抗原的分子量大小選擇合適的電泳分離膠濃度。確定分離膠所需凝膠溶液體積（這些數據一般由廠家提供，例如Bio-Rad Mini-Protean 3 Elecreophoresis Cel 83mm×75mm×0.75mm,兩塊膠需8ml）
按下表給出數據在一小燒杯中按所需丙烯酰胺濃度配置一定體積的分離膠溶液。依次混合各成分。

10ml分離膠各成分所需體積（ml）
        濃度
溶液成分        8%        12%        15%
水        4.6        3.3        2.3
30%丙烯酰胺        2.7        4.0        5.0
1.5mol/L Tris（pH8.8）        2.5        2.5        2.5
10%SDS        0.1        0.1        0.1
10%過硫酸銨        0.1        0.1        0.1
TEMED        0.006        0.004        0.004
一旦加入TEMED，馬上開始聚合，故應立即快速旋動混合物并進入下步操作。
② 迅速在兩玻璃板的間隙中灌注丙烯酰胺溶液，不能有氣泡，留出灌注積層膠所需空間（梳子的齒長再加1cm）。然后小心的在分離膠溶液上覆蓋一層1-5mm的水層，這使凝膠表面變的平整。
③ 等待30-60min，使凝膠聚合。當凝膠聚合后，在分離膠和水層之間會出現一個清晰的界面，可以微微傾斜模具，檢測凝膠是否聚合。用去離子水洗滌凝膠頂部數次以除去未聚合的凝膠，盡可能排去凝膠上的液體，再用濾紙吸凈殘留液體，注意不要接觸膠面。
④ 按下法制備積層膠：按下表給出數據在一個干凈的試管或小燒杯中制備一定體積濃度為5%的丙烯酰胺溶液，依次混合各成分。（兩塊5%積層膠Bio-Rad Mini-Protean 83mm×75mm×0.75mm, 兩塊膠需3ml）
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不同體積積層膠各成分所需體積（ml）
       體積
溶液成分        2        3        5
水        1.4        2.1        3.4
30%丙烯酰胺        0.33        0.5        0.83
1mol/L Tris（pH6.8）        0.25        0.38        0.63
10%SDS        0.02        0.01        0.05
10%過硫酸銨        0.02        0.03        0.05
TEMED        0.002        0.003        0.005
一旦加入TEMED，馬上開始聚合，故應立即快速旋動混合物并進入下一步操作。
⑤ 在已聚合的分離膠上直接灌注積層液。立即在積層膠溶液中插入干凈的實驗預設計的梳子，小心避免混入氣泡，將凝膠垂直放置于室溫下。
⑥ 積層膠聚合*后（30min）,小心移出梳子，使用洗瓶立即用去離子水洗滌加樣槽以除去未聚合的丙烯酰胺。把凝膠固定于電泳裝置上，上下槽各加入Tris*電泳緩沖液。