熒光素標(biāo)記兔抗血管抑制蛋白1抗體IgG，anti-VASH1/FITC

免疫反應(yīng)：
1、用0.01M PBS洗膜，5min ×3次。
2、加入包被液，平穩(wěn)搖動，室溫2hr。
3、棄包被液，用0.01M PBS洗膜，5min×3次。
4、加入一抗（按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋，液體必須覆蓋膜的全部），4℃ 放置12hr以上。陰性對照，以1%BSA取代一抗，其余步驟與實驗組相同。
5、棄一抗和1%BSA，用0.01M PBS分別洗膜，5min×4次。
6、加入辣根過氧化物酶偶聯(lián)的二抗（按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋），平穩(wěn)搖動，室溫2hr。
7、棄二抗，用0.01M PBS洗膜，5min×4次。
8、加入顯色液，避光顯色至出現(xiàn)條帶時放入雙蒸水中終止反應(yīng)。
四、注意事項
1、一抗、二抗的稀釋度、作用時間和溫度對不同的蛋白要經(jīng)過預(yù)實驗確定*條件。
2、顯色液必須新鮮配置使用，zui后加入H2O2。
3、DAB有致癌的潛在可能，操作時要小心仔細(xì)。