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蛋白胨細(xì)胞的三種培養(yǎng)方式
蛋白胨細(xì)胞的培養(yǎng)方式有三種:貼壁培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、無血清懸浮培養(yǎng)。這三種方式均可用于293細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)。293細(xì)胞在無Ca2+或含Ca2+培養(yǎng)基中可同樣生長,也可生長在血清濃度降低的培養(yǎng)基中。單層培養(yǎng)細(xì)胞在5-10%FBS-DMEM中能生長很好。一般來講,1:10傳代后,一周可以長滿。嚴(yán)禁過度生長,這點(diǎn)很重要。
因?yàn)闀?dǎo)致細(xì)胞密度加大和堆積,影響病毒斑的形成和轉(zhuǎn)染,傳代時也不易打散。懸浮的293細(xì)胞很容易大規(guī)模培養(yǎng)基,但不容易長期保持穩(wěn)定。293細(xì)胞在傳代120次以后,其表型可能改變,生長狀況不再*是單層的了,偶爾會形成局部的細(xì)胞成團(tuán)聚集,應(yīng)立即拋棄,重新引入新傳代的細(xì)胞。
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