分光光度計和酶標儀都是光檢測儀器，實驗室中主要用來測定實驗樣本的吸光度，雖然它們的功用基本相同，但是兩者還是有很大差別的。

其主要差異主要有以下幾點：

一、檢測波長范圍的不同

分光光度計雖與酶標儀一樣都使用朗伯-比耳定律進行吸光度測定，但它們的可測光在波長范圍上是有所區別。分光光度計主要分為三種：

紫外分光光度計：主要測定波長范圍為200-380nm的紫外光區.

可見光分光光度計（或比色計）:主要測量波長范圍為380~780 nm的可見光區。 

熒光分光光度計：主要用于液體、凝膠類的光譜掃描。激發波長掃描范圍一般是190~650nm，發射波長掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。 

紅外分光光度計或原子吸收分光光度計適合用于測定2.5～25μm（按波數計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區。

普通的酶標儀主要通過濾光片來激發光源形成特定的波長.在濾光片輪中使用不同的濾光片可獲得不同長度的波長,但波長范圍相對較窄。另外酶標儀具有較強紫外吸收能力，所以在300nm以下波長光區不建議使用酶標儀進行含量測定。

二、檢測效率不同

 酶標儀即酶聯免疫檢測儀是采用48孔或96孔酶標板即微孔板作為樣本容器，可以盛裝不同的樣本以同時測定吸光度，并能快速地進行吸光度對比。而分光光度計采用的是盛樣器皿為比色皿，每次只能測定一種溶液樣本，這樣增加了實驗的重復性，同樣也增加了樣本及試劑的使用量，測定效率也遠遠低于酶標儀。

三、 光路的方向的不同

由于根據測定樣本方式的不同，兩者的光路設計也不相同。分光光度計采用的水平光路設計，也就是光線水平通過樣本和比色皿，其測定結果不會受到垂直方向因素影響。酶標儀所采用的是垂直光路設計，這樣光線可以一次通過所有待測孔。但它的缺點在于容易受到樣本溶液液面平整度、待測樣本濃度、微孔板的通透性能等因素影響而造成實驗數據偏差。

四、光路的長度的不同：

 由于樣本的吸光系數與樣本濃度、光路長度及OD值成正比例關系。所以光路的長度也會影響到吸光率。在分光光度計中，由于其光路是水平的，光路長度近似于比色皿的寬度，一般為1厘米左右。而酶標儀的光路長度則取決于樣本溶液的液面高度，這就要保證每個孔內的液面高度要一致，如果樣本液面的高度參差不齊，也會直接影響實驗結果的準確度。

由此可見，吸光度的測定需要根據不同的實驗內容去選擇對應的儀器設備，有效地揚長避短，這樣才能較大程度發揮儀器的功用，從而提高實驗效率和準確的實驗結果。

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