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南京卡米洛生物工程有限公司
主營產(chǎn)品： 小鼠IgA類單克隆抗體腹水純化試劑盒,人17α-羥孕酮,豬雌二醇,白介素1受體拮抗劑 |
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ELISA試劑盒標準曲線的建立
2023-5-9 閱讀(715)
很多老師第一次接觸ELISA實驗時，對于ELISA的標準曲線如何更好的建立可能會有疑惑。下面我們?yōu)榇蠹姨峁?種建立標曲的方法。
一、使用：CurveExpert 漢化版 V1.4 軟件作圖。
1、下載好軟件并解壓。
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2、點擊圖標進入軟件后，將標曲OD值、標曲濃度復制粘貼進軟件中。
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3、選擇合適的方程建立標曲。可選擇 二項式、直線線性、四參數(shù)等方式擬合標曲。
除非標曲做的特別好，誤差小、R值高，可以選擇直線線性擬合；一般都建議使用二項式擬合。
下面我們使用二項式擬合。
4、點擊“ 二項式擬合"鍵，得到下圖，可以看到中間的曲線及右側(cè)標曲的R值=0.999
再點擊左側(cè)的“Info"鍵，得到標曲的公式以及公式的系數(shù)。
5、公式：Y=a+bX+cX^2
X為已知樣本的OD值，a、b、c為標曲公式已知的系數(shù)，則Y為待求的樣本濃度。
將上圖的公式帶入excel表格中，將樣本OD值帶入公式。
6、點擊“回車"鍵，得到公式換算的樣本濃度。
再將鼠標光標移到方框右下角，雙擊，將剩余的樣本濃度自動填充結(jié)果，結(jié)束計算。
二、使用EXCEL表格“散點圖"作圖。
首先選中標曲數(shù)據(jù)（1）；
點擊“插入"（2）；
建立“散點圖"（3）；
選擇圖右上角的“圖表元素"（4）；
選擇“趨勢線"（5）；
下一級的“更多選項"（6）；
然后點擊畫面右側(cè)的“多項式"或者“線性"，這里我們選擇“多項式"建立標曲（7）；
再點擊下方的“顯示公式"、“顯示R平方值"（8）；
再建立公式，將樣本OD值，帶入得到的公式中（9），
得到換算的樣本濃度。
