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LNCAP FGC人前列腺癌細胞(STR鑒定)

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更新時間:2018-05-25 14:18:10瀏覽次數:259次

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產品簡介

LNCAP FGC人前列腺癌細胞(STR鑒定)人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離,該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。這株細胞并不形成*的單層,而是形成集落,在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養基變酸。生長很慢,傳代后48小時內不應

詳細介紹

LNCAP FGC人前列腺癌細胞(STR鑒定)
英文名稱:
規格:1*10 6  
細胞介紹
人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離,該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。這株細胞并不形成*的單層,而是形成集落,在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養基變酸。生長很慢,傳代后48小時內不應擾動。當培養瓶封包后,多數細胞從培養瓶底分離,懸浮在培養基中。收到后,在通常培養單層細胞的條件下培養24到48小時,以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。如果需要,培養瓶內容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養液重懸并培養到一個單獨的培養瓶中。請使用Corning的Cellbind培養瓶培養。
一、細胞特性
1) 來源:前列腺;左鎖骨淋巴結癌轉移灶
2) 形態:上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
LNCAP FGC人前列腺癌細胞(STR鑒定)
在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;

  1. 凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
  2. 存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
  3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。

相關細胞系列表:

MDA-MB-415人乳腺腺癌細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

NCI-H1395人肺腺癌細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

C-33 A人子 人源 1×10^6 細胞數/ml

SK-NEP-1人腎母細胞瘤細胞 人 1×10^6 細胞數/ml

ME-180人子宮頸表皮癌細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]人骨肉瘤細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

A-375人惡性黑色素瘤細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

SV-HUC-1人輸尿管上皮永生化細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

JAR人胎盤絨毛癌細胞 人源 1×10^6 細胞數/ml

關鍵詞:培養箱 顯微鏡

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