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A549人肺癌細胞(STR鑒定)

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所  在  地上海市

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更新時間:2018-05-23 11:02:33瀏覽次數:1437次

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經營模式:生產廠家

商鋪產品:2964條

所在地區:上海上海市

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產品簡介

A549人肺癌細胞(STR鑒定)由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。
英文名稱:Human Lung Cancer Cells
1) 來源:肺癌
2) 形態:上皮細胞樣,多角形;貼壁生長
3) 含量:>1x106
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1m

詳細介紹

A549人肺癌細胞(STR鑒定)

英文名稱:Human Lung Cancer Cells

規格:1*10 6  

細胞介紹

該細胞系由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。

一、細胞特性

1) 來源:肺癌

2) 形態:上皮細胞樣,多角形;貼壁生長

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

二、細胞收到后處理

A549人肺癌細胞(STR鑒定)在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。

三、細胞培養步驟

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?

(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;

  1. 凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
  2. 存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
  3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。

相關細胞系列表:

COS-1 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 非洲綠猴
COS-7 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 非洲綠猴 DMEM 貼壁
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] 非洲綠猴腎細胞 非洲綠猴
Vero 非洲綠猴腎細胞 非洲綠猴 EMEM 貼壁
VERO C1008 (E6) 非洲綠猴腎細胞 非洲綠猴 DMEM 貼壁
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MDBK (NBL-1) 牛腎細胞 牛 EMEM 貼壁
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Super Tube 狗腎細胞 狗
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CRFK 貓腎細胞 貓
F81 貓腎細胞 貓 1640 貼壁
BHK-21 [C-13] 倉鼠腎成纖維細胞 倉鼠 EMEM 貼壁
CHL 倉鼠肺細胞 中國倉鼠 DMEM 貼壁
R 1610 倉鼠肺細胞 中國倉鼠
V79 倉鼠肺細胞 中國倉鼠
CHO/dhFr- 倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 中國倉鼠 F12K 貼壁
CHO-K1 倉鼠卵巢細胞亞株 中國倉鼠 F12K 貼壁
CTLA4 Ig-24 中國倉鼠卵巢細胞 中國倉鼠
Lec1 倉鼠卵巢細胞 中國倉鼠
HMy2.CIR 人B淋巴母細胞 人 IMDM 懸浮
hFOB 1.19 人SV40轉染成骨細胞 人
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮細胞 人 1640 貼壁
EA.hy926 人臍靜脈細胞融合細胞 人

 

關鍵詞:培養箱 顯微鏡

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