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上海邦景實業有限公司
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防止PCR實驗污染的方法
2025-3-11 閱讀(64)
進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，-大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。
一、劃分操作區：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現全閉管操作，但無論是否能夠達到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區域內進行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行：
l 試劑準備區。
l 標本制備區。
l PCR擴增區及分析區。
切記：任何一間的產物及器材不要拿到其他兩個工作區。
二、分裝試劑：PCR擴增所需要的試劑均應在生物安全柜、裝有紫外燈的超凈工作臺或負壓工作臺配制和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放于其中，不能用來吸取擴增后的DNA和其他來源的DNA：
n PCR用水應為高壓的雙蒸水；
n 引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴增產物區配制；
引物和dNTP應分裝儲存，分裝時應標明時間，以備發生污染時查找原因。
