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江蘇菲亞生物科技有限公司
主營產品： 轉化生長因子 elisa試劑盒,植物葉酸 elisa試劑盒,豬藍耳(PRRS)elisa kit |
公司信息
酶免ELISA試劑盒的細節處理
2017-5-18 閱讀(968)
一、細胞裂解液的細節處理：
1. 吸去培養板內的培養基，用胰酶消化細胞，加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2. 收集細胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養基，用預冷的PBS潤洗3次。
3. 加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
4. 將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復凍融幾次，使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎，以達到裂解的目的。
5. 4℃10000×g離心10min，除去細胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
二、酶免ELISA試劑盒組織勻漿液的細節處理：
1. 將組織樣本用PBS(0.01M, PH 7.4)沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質。
2. 將組織塊稱重，記錄后剪碎，碎塊應盡量小，便于勻漿得更充分
3. 將組織按一定的比例加入預冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿，勻漿時置于冰上或冰浴中。
4. 吸取勻漿液到離心管，4℃5000×g離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
