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規格	5×105Cells/T25培養瓶	組織來源	雞卵泡組織
貨號	CS-X2678	細胞形態	成纖維細胞樣

產品信息：

貨號	CS-X2678	組織來源	雞卵泡組織
傳代特性	可傳2-3代	培養基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態	成纖維細胞樣	生長特性	貼壁
培養條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

雞卵泡基膜細胞

商品介紹：

產品名稱：雞卵泡基膜細胞
2.組織來源：雞卵泡組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

雞卵泡基膜細胞分離自雞卵泡組織；成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔，內膜細胞呈多邊形，胞質清亮，胞核圓形，細胞間可見許多毛細血管，外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結締組織分界不明顯。卵泡（follicle）中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞，在卵泡開始發育、卵細胞成長的同時，周圍的菱形細胞變為立方形，并由單層增生成復層，因其細胞漿內含有顆粒，故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層；次級卵泡的顆粒細胞增至復層；成熟卵泡的顆粒細胞展開又變為單層。顆粒細胞的胞核大而圓，著色深，細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的雞卵泡基膜細胞采用先機械分離后膠原酶反復消化法、并通過專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的雞卵泡基膜細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳2-3代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；

2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。

雞卵泡基膜細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。

3）、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

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操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基，使細胞處于指數生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養之細胞，用加血清的培養基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。