貼壁細胞染色步驟

時間：2016/2/26閱讀：866

一、染液制備

1. 稱取0.5g吉姆薩粉和22ml甘油；細胞

2. 取少量甘油與吉姆薩粉在研缽內(nèi)充分混合，研磨至無顆粒；

3. 將剩余的甘油倒入研缽，于56℃保溫2h；

4. 加入33ml純甲醇混勻，即為吉姆薩母液，將其保存于棕色試劑瓶內(nèi)；

5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen緩沖液和1份吉姆薩母液混合即得染色液。

二、貼壁細胞染色步驟

1. 去除培養(yǎng)器皿內(nèi)的培養(yǎng)液，用*反復漂洗單層培養(yǎng)物2次；

2. 加入*，再逐滴加入等體積甲醇，邊加邊混合，靜置10min；

3. 將50%甲醇-BSS混合液丟棄，加入新鮮的甲醇液浸泡固定細胞10min，然后用甲醇漂洗細胞1次；

4. 將瓶內(nèi)細胞干燥后儲存或直接染色；

5. 按2ml/cm2 的比例滴加吉姆薩染液，覆蓋細胞層，染色2min；

6. 移除染液，用自來水沖洗掉粉紅色背景后，再用去離子水沖洗細胞；

7. 用顯微鏡觀察單層潮濕細胞。若細胞已干，可重新使細胞潮濕后再觀察。

三、結(jié)果：

細胞核被染成紫紅色或紫藍色，而細胞質(zhì)則被染成淺紅色。

四、吉姆薩染色法注意事項：

1. 染液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，舊染液染色效果不佳。染液保存時間不宜超過48h；

2. 吉姆薩對pH極敏感，因此，緩沖液pH要準確，否則染色效果不佳。如用染色缸染色時，隨染色時間的延長，在染液表面常形成一層氧化膜（發(fā)亮）易附著在玻片上形成污穢，且不易除掉。因此在用染色缸染色，尤其用的不是現(xiàn)配者時，染色前應先用小片濾紙刮除液面的氧化層再進行染色。染色完畢，應把標本浸入水中漂洗染液。細胞

精品视频在线观看一区二区三区_v片免费看_欧美国产精品久久_国产真实乱免费高清视频_欧美精欧美乱码一二三四区_狠狠色婷婷j丁香综合社区

貼壁細胞染色步驟

會員登錄

收藏該商鋪

提示