哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)無(wú)疑是生物學(xué)研究中zui重要的一環(huán)。哺乳動(dòng)物細(xì)胞相對(duì)嬌貴，需要特殊的培養(yǎng)環(huán)境。這一環(huán)境主要是由CO2培養(yǎng)箱來(lái)提供的。讓你的CO2培養(yǎng)箱正常運(yùn)作，遠(yuǎn)離污染，對(duì)細(xì)胞的成功培養(yǎng)尤為重要。以下建議來(lái)自Eppendorf的產(chǎn)品Charlie Villano。
避免污染
哺乳動(dòng)物細(xì)胞是在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的，并且培養(yǎng)溫度有利于幾乎所有微生物的生長(zhǎng)。盡管許多研究人員在培養(yǎng)基中加入抗生素或抗菌素，作為預(yù)防措施，但這并不能解決方法上的錯(cuò)誤，反而掩蓋了潛在的問(wèn)題。如果可能的話(huà)，避免使用這些抗生素，不斷改善你的無(wú)菌技術(shù)，來(lái)保持你的培養(yǎng)箱干凈。
微生物通常是“破門(mén)而入”。這雖然是顯而易見(jiàn)的，但要*避免，也沒(méi)那么容易。在培養(yǎng)箱中放置東西時(shí)，一定要戴上手套，并盡量減少內(nèi)層玻璃門(mén)打開(kāi)的時(shí)間。經(jīng)常用75%的乙醇擦拭門(mén)把手。保持濕度盤(pán)中的水清潔，每周更換。定期用肥皂和水清洗濕度盤(pán)，并用乙醇擦拭，或高壓滅菌。如果培養(yǎng)基灑在了培養(yǎng)箱內(nèi)，應(yīng)取出層架*清潔。
清洗工作的頻率取決于你的培養(yǎng)箱使用得有多頻繁。在大型實(shí)驗(yàn)室，培養(yǎng)箱需要經(jīng)常清洗。如果你剛開(kāi)始用一個(gè)干凈的培養(yǎng)箱，又處處小心，那么它可在幾周或幾個(gè)月內(nèi)保持干凈。
保證CO2的水平
大多數(shù)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)基使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。CO2是這一系統(tǒng)中的重要組成部分，必須保持在5%，以維持培養(yǎng)基的生理pH。盡管幾乎所有的培養(yǎng)箱都配備CO2傳感器，但隨著時(shí)間的推移，校準(zhǔn)會(huì)偏離設(shè)定點(diǎn)，需要操作人員直接測(cè)定CO2來(lái)重新校準(zhǔn)。測(cè)定CO2水平的zui簡(jiǎn)單、zui準(zhǔn)確方法是使用氣體分析儀，如Fyrite裝置。它們有專(zhuān)門(mén)測(cè)定CO2或O2水平的型號(hào)。
舊型號(hào)的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的重新校準(zhǔn)，而的型號(hào)每月會(huì)進(jìn)行CO2傳感器的自動(dòng)歸零。盡管這些型號(hào)幾乎不需要手動(dòng)校準(zhǔn)，但用戶(hù)也應(yīng)當(dāng)用Fyrite裝置來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)室的CO2水平。
維持37℃
哺乳動(dòng)物細(xì)胞也和我們一樣，喜歡37℃的溫度。大部分CO2培養(yǎng)箱都配有顯示器，報(bào)告內(nèi)室的溫度，但定期檢查也是個(gè)不錯(cuò)的主意。使用一個(gè)高品質(zhì)、已校準(zhǔn)的溫度計(jì)。將溫度計(jì)貼在玻璃門(mén)的內(nèi)側(cè)，這樣可以從外面讀取溫度，而不用打開(kāi)玻璃門(mén)。在前一天下班前貼上。第二天一早，讀取溫度。重復(fù)多次，如果溫度計(jì)很準(zhǔn)的話(huà)，讀數(shù)不是37℃，那就有必要重新校準(zhǔn)溫度傳感器。
保持潮濕
培養(yǎng)箱內(nèi)部的溫度相對(duì)較高，因此在沒(méi)有高濕度的情況下培養(yǎng)基的蒸發(fā)將是個(gè)實(shí)際的問(wèn)題。通過(guò)培養(yǎng)箱底部的濕度盤(pán)，可維持相對(duì)較高的濕度（90%~95%）。但缺點(diǎn)是，裝滿(mǎn)水的濕度盤(pán)也是個(gè)潛在的污染源。
    總之，定期維護(hù)和清潔是保持你的CO2培養(yǎng)箱正常運(yùn)作并遠(yuǎn)離污染的zui有效方法。