雞α干擾素elisa試劑盒使用說明書
elisa試劑盒使用目的：
本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中α干擾素（IFN-α）含量。
elisa試劑盒實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞α干擾素（IFN-α）水平。用純化的雞α干擾素（IFN-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素（IFN-α），再與HRP標(biāo)記的α干擾素（IFN-α）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α干擾素（IFN-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中雞α干擾素（IFN-α）濃度。
elisa試劑盒試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（120pg/ml） 0.5ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
雞elisa試劑盒標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
上海研晶生物技術(shù)有限公司以服務(wù)生物技術(shù)科研事業(yè)的發(fā)展為己任，是一家專業(yè)從事生物試劑方面銷售和技術(shù)服務(wù)的國內(nèi)合資公司。產(chǎn)品范圍涉及細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)，免疫學(xué)及生物化學(xué)等實驗室科學(xué)研究試劑，包括細(xì)胞系，細(xì)胞培養(yǎng)，ELISA和免疫組化抗體，一抗，二抗，單克隆和多克隆抗體，PCR及放免試劑盒，生化試劑以及各類實驗耗材和儀器設(shè)備。同時銷售國外品牌試劑美國SIGMA、日本W(wǎng)AKO以及進(jìn)口血清和OMEGA試劑盒等。
