人胱抑素C試劑盒正確操作！

產品名稱：人胱抑素C試劑盒

規格：48T/96T

儲存：2-8℃，避光保存

有效期：6個月

本產品僅供科研實驗用，不做其它用途！

檢測原理：試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先 包被人胱抑素C（Cys-C）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、 標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB 顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉 化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胱抑素C（Cys-C）呈正 相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品 濃度。

實驗步驟（僅供參考）：

1． 使用前，將所有試劑充混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣的誤差。

2． 根據待測樣品數量加標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗T。蓋膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。