甘油三酯（TG）含量測(cè)定試劑盒太好了！

產(chǎn)品內(nèi)容：

規(guī)格：50 管/48 樣
試劑內(nèi)容：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑五：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑六：液體×1 瓶，4℃避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，1mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯溶液，4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
TG 是長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不僅是細(xì)胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。 測(cè)
定原理： 用異丙醇抽提取TG，KOH 皂化TG 后水解生成甘油及脂肪酸，過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛，
在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì)，在420 nm 有特征吸收峰，其顏色的深淺與TG
含量成正比。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml 玻璃比色皿、雙蒸水
操作步驟:
一、TG 的提取：
1、 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL
試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清待測(cè)。
2、 細(xì)胞、細(xì)菌：先收集400-500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加1mL 試劑一，超聲波破碎
1min（強(qiáng)度20％，超聲2s，停1s），8000g， 4℃離心10min，取上清待測(cè)。
3、 血清（漿）等液體樣品：直接測(cè)定。

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二、測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到420 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 水浴鍋預(yù)熱到65℃。

空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管

雙蒸水（μ l） 100
1mg/ml 標(biāo)準(zhǔn)液（μ l） 100
TG 待測(cè)液（μ l） 100
試劑一（μ l） 1250 1250 1250
試劑二（μ l） 250 250 250
加試劑一后充分混勻，再加試劑二，劇烈振蕩30s，靜置，待分層后取上層溶液0.15mL，置于
新的EP 管中。
3．甘油三酯含量測(cè)定：
空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管
上層溶液（μ l） 150 150 150
試劑三 （μ l） 500 500 500
試劑四（μ l） 150 150 150
充分混勻，65℃水浴3min
試劑五（μ l） 500 500 500
試劑六（μ l） 500 500 500
充分混勻，65℃水浴15min
取出EP 管，待冷卻后，于420nm 處比色，記為A 空，A 標(biāo)和A 測(cè)。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
3. zui低檢出限為100μ mol/L。

注意事項(xiàng)：
1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需佩戴手套和口罩，試劑瓶蓋打開(kāi)后應(yīng)該及時(shí)蓋緊。
2. 加試劑二后需劇烈震蕩，使待測(cè)液中甘油三酯得到充分提取。

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