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瘦素(LEP) Western blot實驗檢測

時間:2017/10/17閱讀:3019
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瘦素(LEP) Western blot實驗檢測

瘦素(Leptin,LP)是一種由脂肪組織分泌的蛋白質類激素。人們之前普遍認為它進入血液循環后會參與糖、脂肪及能量代謝的調節,促使機體減少攝食,增加能量釋放,抑制脂肪細胞的合成,進而使體重減輕。

主要由白色脂肪組織產生。其前體由167個氨基酸殘基組成,N末端有21個氨基酸殘基信號肽,該前體的信號肽在血液中被切掉而成為146氨基酸,分子量為16KD,形成Leptin。Leptin具有廣泛的生物學效應,其中較重要的是作用于下丘腦的代謝調節中樞,發揮抑制食欲,減少能量攝取,增加能量消耗,抑制脂肪合成的作用。

研究表明編碼基因ob,缺失ob基因的大鼠,食欲旺盛,體重顯著增加,導致病態肥胖。它在身體的濃度使腦部知道現時身體上的脂肪數量,藉以控制食欲及新陳代謝的速率。
瘦素透過抑制體內神經肽Y neuropeptide Y (NPY)刺鼠肽基因相關蛋白agouti-related peptide (AgRP)的活躍程度,從而使體內另一種荷爾蒙黑色素細胞刺激激素alpha-melanocortin stimulating hormone (α-MSH)的活躍情度增強。
隨著2000年以來對瘦素探討的不斷深入,人們開始認識到瘦素不僅由脂肪組織分泌,其它組織如乳腺上皮細胞、胎盤、胃黏膜上皮細胞也中可檢測到,其受體不僅存在于丘腦、脂肪組織,還廣泛存在于全身各個組織。瘦素與機體系統的病理生理關系正逐步被人們了解。

瘦素(LEP) Western blot實驗檢測

蛋白質印跡法是由瑞士*弗雷德里希生物研究所(Friedrich Miescher Institute)的Harry Towbin在1979年提出的。在尼爾·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化學》(Analytical Biochemistry)中被稱為Western Blot。蛋白免疫印跡(Western Blot)是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術,現已廣泛應用于基因在蛋白水平的表達研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面。

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