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小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸elisa試劑盒

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所在地鹽城市

更新時間:2018-03-25 19:24:48瀏覽次數(shù):273次

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小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸elisa試劑盒"間接法步驟:

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4過夜;

2.次日洗滌3次;

3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37孵育1小時,洗滌;

4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;

5.37孵育35-60分鐘,洗滌;

6.zui后一遍用DDW洗滌。

7.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。

8.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

9.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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