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技術文章

ELISA的技能點我們了解多少

閱讀:247發布時間:2017-4-21

                    ELISA的技能點我們了解多少

為了得到非常好的試驗成果,一些ELISA試劑盒試驗新手們還需多加了解技能內容,公司每周都會為您精心整理出重點技能方法,可以嫻熟的掌握好這些以后再應用到試驗里面就會簡略的多。今天的主要內容ELISA試劑盒的一些技能關鍵:
樣本加樣方法
1、細胞上清:前處理有必要是細胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時,用規范品稀釋液直接稀釋。
2、腦脊液:前處理有必要是細胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時,用規范品稀釋液直接稀釋。
3、血清血漿:請參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規范品稀釋液彌補至100ul。
4、安排勻漿液的樣本,要制備過程中需要在緩沖液中參加蛋白酶按捺劑,防止蛋白成份被內源性蛋白酶降解,形成檢查成果的值偏低。


A.血清標本應是自然凝結后,取上清,防止在冰箱中凝結血液;
B.血漿標本,引薦用EDTA的方法搜集若待測樣本不能及時檢查,標本搜集后請分裝,凍存于-20℃,防止反復凍融。
c.血清標本不該增加任何防腐劑或抗凝劑;
D.標本應明澈通明,檢查前樣本中如有懸浮物應經過離心去掉。
E.請勿運用溶血,高血脂或污染的標本檢查,不然成果將不。


因安排勻漿液的樣本蛋白品種多,含量豐厚,試驗參照血清血漿標本的處理方法進行,不然就會影響試驗成果。詳細是參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標本,需稀釋時,請將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規范品稀釋液彌補至100ul。


因為方針蛋白不一樣,也許形成降解的蛋白類型也許不一樣,假如試驗前經過文獻斷定用哪種蛋白酶按捺劑,有針對性參加,可節約按捺劑。假如查不到有關文獻,可采用組合按捺的方法保證蛋白不易被降解。


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