1968年Miles和Hales建立了利用核素標記的抗體檢測抗原的放射分析法，為了與放射免疫分析區(qū)別，故稱免疫放射分析技術(shù)（immunoradiometricassay，IRMA）。由于它應(yīng)用核素標記抗體作為示蹤劑，在反應(yīng)體系中加入過量的抗體，待測抗原（或標準品）與和核素標記抗體進行全量反應(yīng)，故亦稱非競爭性免疫分析法。IRMA與RIA相比較有以下特點：
　　
　　1、IRMA反應(yīng)系統(tǒng)中應(yīng)用的標記物為免疫球蛋白。易于提純和進行碘化標記，標記抗體的比活度較高，有利于提高分析的靈敏度，且不同抗體的標記方法基本相同；而在RIA中應(yīng)用的標記物是抗原?？乖N類繁多，化學結(jié)構(gòu)各異，較難獲得純品，標記方法亦多種多樣。
　　
　　2、在IRMA反應(yīng)系統(tǒng)中使用過量的標記抗體，直接與抗原結(jié)合，不存在競爭結(jié)合的復雜反應(yīng)，因此反應(yīng)速度較快，即使使用親和力較低的單可隆抗體，也能滿足實驗要求；而在RIA中抗體是微量的，所以一定要用高親和力的多可隆抗體
　　
　　3、IRMA使用的標記抗體和固相抗原在反應(yīng)中都是過量的，只有待測樣品加樣誤差才會影響分析結(jié)果，因此IRMA的批內(nèi)和批間變異（CV%）比較??；而RIA使用的抗體和標記抗原在反應(yīng)中是固定量的，加樣誤差可嚴重影響測定結(jié)果。
　　
　　一、基本原理
　　
　　將核素標記在抗體上，然后以過量的標記抗體與待測抗原結(jié)合，未結(jié)合的標記抗體通過和固相的抗原免疫吸附劑結(jié)合而去除，溶液中的放射性與待測抗原的含量呈正相關(guān)。根據(jù)檢測過程的操作步驟不同，有以下幾種類型
　　
　　1、直接IRMA法
　　
　　將待測抗原與過量的標記抗體進行溫育，使二者結(jié)合，然后加入固相抗原免疫吸附劑再次溫育，吸附游離的標記抗體。離心去除沉淀物，測定上清液中放射性強度，根據(jù)標準曲線即可得知待測樣品中抗原的含量。
　　
　　2、雙抗體夾心IRMA法
　　
　　在待測抗原內(nèi)依次加入固相抗體和標記抗體，反應(yīng)后形成固相抗體（Ab1）-抗原-標記抗體（Ab2）復合物，洗滌去除游離的標記抗體，測定固相抗體或載體上免疫復合物的放射性強度，根據(jù)標準曲線即可得知待測樣品中抗原的含量。此法僅用于檢測有多個決定簇的多肽和蛋白質(zhì)抗原。
　　
　　3、間接IRMA法
　　
　　此法是在上述雙抗體夾心法的基礎(chǔ)上，進一步改良為用核素標記抗Ab2的抗體（羊抗兔或抗鼠的IgG），反應(yīng)后形成固相抗體（Ab1）-抗原-Ab2-*Ab3（標記抗抗體）的四重免疫復合物。其中，Ab3可作為通用試劑，可省去標記針對不同抗原的特異性抗體。
　　
　　4、BSA-IRMA法
　　
　　是將*-親合素系統(tǒng)（BSA）引入免疫放射分析，建立的新一代IRMA。此法zui大的優(yōu)點是使用*化抗體和以核素標記親合素為示蹤劑，可以通用于甾體類、前列腺素等小分子物質(zhì)的檢測。由于1個抗體分子上可標記數(shù)十個*分子，而每個親合素又可與4個*分子結(jié)合，從而產(chǎn)生多級放大效應(yīng)。同時*與親合素之間的親和力要比抗原抗體間的親和力大10萬-100萬倍，二者結(jié)合極為穩(wěn)定，因此，使其靈敏度、特異性和精密度都大大提高。目前一些超靈敏度的IRMA分析試劑盒就是應(yīng)用上述原理制成的。
　　
　　二、基本試劑及材料
　　
　　1、標記抗體
　　
　　2、固定抗原吸附劑
　　
　　3、標準抗原
　　
　　4、待測樣本
　　
　　5、γ計數(shù)儀和低溫離心機
　　
　　三、操作方法
　　
　　以固相雙抗體法測定血清中促甲狀腺素（TSH）為實例
　　
　　1、按下表逐一加樣（加樣量為ml，均設(shè)雙復管）
　　
　　混勻，37℃溫育120min
　　
　　棄上清（T*除外，以下同），加2ml洗滌液，放置2min
　　
　　棄上清，再加2ml洗滌液，放置2min
　　
　　棄上清，將各管倒置在吸水紙上
　　
　　2、用γ計數(shù)儀分別測量各管放射性強度，以兩管cpm的均值表示，分別計算結(jié)合率（B%，即B/T*´100%）
　　
　　3、用B%為縱坐標，不同濃度的TSH標準品為橫坐標繪制標準曲線，然后根據(jù)檢測管的B%，從標準曲線中即可查得相應(yīng)的TSH含量。上海友騰生物傾力為客戶提供上萬種科研試劑，提供*、zui全、zui有效的科研試劑產(chǎn)品，質(zhì)量被全國各大院?？蒲袡C構(gòu)認可。
　　
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