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冰凍切片的基質(zhì)金屬蛋白酶原位明膠酶譜法熒光染色試劑盒

2015-6-10  閱讀(653)

提 供 商 上海哈靈生物科技有限公司 資料大小 56KB
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【詳細說明】

主要用途


 冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑是一種旨在通過異硫氰酸熒光素標記的明膠作為底物,針對未固定處理的冰凍切片予以染色處理,基質(zhì)金屬蛋白酶切離底物產(chǎn)生高度綠色熒光,來定位組織中的基質(zhì)金屬蛋白酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種冰凍動物組織的基質(zhì)金屬蛋白酶-2和9的分析。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,敏感度高,熒光清晰,重復(fù)性好。


技術(shù)背景


基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinases;MMPs是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱,因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)(extracellular matrix)成分,同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissue resorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類:(1)膠原酶:MMP1MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2MMP9,又稱明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3MMP7、MMP16MMP11,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細胞并不儲備MMPs,當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成,合成的MMPs以無活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)。原位明膠酶譜法熒光染色(in-situ fluorescence zymography)技術(shù)在于提高基質(zhì)金屬蛋白酶檢測的敏感性,使用異硫氰酸熒光素FITC)標記的明膠作為底物,經(jīng)過基質(zhì)金屬蛋白酶水解后產(chǎn)生熒光多肽,據(jù)此在熒光顯微鏡下檢測酶的活性和位置。



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