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組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

2015-6-4  閱讀(641)

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主要用途


 組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE I)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)肉堿脂酰輔酶A以及特定抑制劑反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解樣品中酶活性而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。


技術(shù)背景


脂肪酸β氧化過(guò)程(β-oxidation)在動(dòng)物組織的線(xiàn)粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及zui后經(jīng)三羧酸循環(huán)被*氧化生成CO2H2O并釋放能量等四個(gè)階段。大于10個(gè)碳(C10)的活化型長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A是不能直接透過(guò)線(xiàn)粒體內(nèi)膜,需要借助肉堿(camitine),即L-3-4-*基銨丁酸,被轉(zhuǎn)運(yùn)入線(xiàn)粒體內(nèi),在線(xiàn)粒體內(nèi)膜的外側(cè)及內(nèi)側(cè)分別有肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(carnitine palmitoyl transferase;CPT;EC2.3.1.21)I。位于內(nèi)膜外側(cè)的酶,促進(jìn)脂酰CoA轉(zhuǎn)化為脂酰肉堿,后者可借助線(xiàn)粒體內(nèi)膜上的轉(zhuǎn)位酶(或載體),轉(zhuǎn)運(yùn)到內(nèi)膜內(nèi)側(cè),然后,在酶催化下脂酰肉堿釋放肉堿到胞漿留下脂酰CoA。由此位于胞漿活化脂肪酸―脂酰CoA穿過(guò)線(xiàn)粒體內(nèi)膜進(jìn)入基質(zhì)而被氧化分解。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶缺失癥導(dǎo)致機(jī)體無(wú)法代謝脂肪酸。基于肉堿脂酰輔酶A丙二酰輔酶Amalonyl CoA)存在與否的條件下,通過(guò)肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-2-硝基苯甲酸[5,5-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化412nm波長(zhǎng),來(lái)定量分析丙二酰輔酶A敏感性肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I的特異活性。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I反應(yīng)系統(tǒng)為:



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