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上海哈靈生物科技有限公司

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組織肉毒堿棕櫚酰轉移酶I活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書

2015-6-4  閱讀(642)

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【詳細說明】

主要用途


 組織肉毒堿棕櫚酰轉移酶I(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE I)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過肉堿脂酰輔酶A以及特定抑制劑反應系統中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑,產生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產物吸光峰值的變化即采用比色法來測定組織裂解樣品中酶活性而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)肉毒堿棕櫚酰轉移酶I的特異活性檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。


技術背景


脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉移、β氧化及zui后經三羧酸循環被*氧化生成CO2H2O并釋放能量等四個階段。大于10個碳(C10)的活化型長鏈脂酰輔酶A是不能直接透過線粒體內膜,需要借助肉堿(camitine),即L-3-4-*基銨丁酸,被轉運入線粒體內,在線粒體內膜的外側及內側分別有肉堿脂酰轉移酶(carnitine palmitoyl transferase;CPT;EC2.3.1.21)I。位于內膜外側的酶,促進脂酰CoA轉化為脂酰肉堿,后者可借助線粒體內膜上的轉位酶(或載體),轉運到內膜內側,然后,在酶催化下脂酰肉堿釋放肉堿到胞漿留下脂酰CoA。由此位于胞漿活化脂肪酸―脂酰CoA穿過線粒體內膜進入基質而被氧化分解。肉堿脂酰轉移酶缺失癥導致機體無法代謝脂肪酸。基于肉堿脂酰輔酶A丙二酰輔酶Amalonyl CoA)存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉移酶的作用,產生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-2-硝基苯甲酸[5,5-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應后,產生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過其吸收峰值的變化412nm波長,來定量分析丙二酰輔酶A敏感性肉堿脂酰轉移酶I的特異活性。肉堿脂酰轉移酶I反應系統為:



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