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上海哈靈生物科技有限公司

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精子活力和頂體形態雙重熒光染色試劑盒產品說明書

2015-5-5  閱讀(739)

提 供 商 上海哈靈生物科技有限公司 資料大小 35KB
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資料類型 WORD 文檔 瀏覽次數 739次
【詳細說明】

主要用途


  精子活力和頂體形態雙重熒光染色試劑是一種旨在使用赫斯特33258和熒光素標記的花生凝集素雙重熒光染色技術,分析精子活力以及頂體狀態而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞的檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩定,熒光清晰。


技術背景


在男科學Andrology中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizing potential)、膜結構或染色質結構完整性(integrity)、頂體反應(acrosomal reaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(in vitro fertilizationIVF)的重要參數。其中頂體反應,是指當精子接近卵子實施授精時,精子頭部前半端的帽狀結構頂體,釋放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。頂體反應測試是一項穩定的精子功能參數,可以用于預測受精成功率。因此頂體的結構完整性(intact)是評價的主要標志,也是不育癥和避孕藥物研究的對象。使用DNA敏感性熒光染料赫斯特33258(Hoechst 33258)和熒光素標記的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin;PNA-FITC雙重熒光染色技術,是精子活力,以及精子頭部頂體狀態分析和授精效率評價的zui常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點,受到活體精子細胞(包括游動性和非游動性精子)的排斥,而容易進入死亡精子細胞。其次使用熒光素標記的花生凝集素染料,與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基(β-D-galactosyl residue)的結合,顯示完整性(未反應性unreacted)頂體,同時可以應用于受精時的精卵反應。雙染的作用,以幫助區分生理性反應性頂體缺失(loss)或病理性退行性頂體缺失。通過常用的熒光顯微鏡(激發波長488nm,散發波長530nm)便可清晰觀察到綠色頂體狀態(status)。



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